目前，DIA 技術(shù)作為蛋白質(zhì)組學(xué)定量技術(shù)的主流之選，其運(yùn)用獨(dú)特的 Data Independent Acquisition（數(shù)據(jù)非依賴采集）技術(shù)來(lái)采集數(shù)據(jù)。相較于傳統(tǒng)的數(shù)據(jù)依賴掃描模式（DDA），DIA 方法展現(xiàn)出卓越的特性。它擁有更出色的重復(fù)性，能確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定與可靠；具備更高的蛋白覆蓋率，如同編織了一張更為細(xì)密的網(wǎng)，捕捉更多蛋白質(zhì)信息；還擁有令人稱贊的定量準(zhǔn)確度。也正因如此，在諸如標(biāo)志物研究、疾病精準(zhǔn)分型以及品系比較等需要大規(guī)模樣本分析的領(lǐng)域中，DIA 成為了科研人員優(yōu)先考量的前沿技術(shù)?。
產(chǎn)品定義
DIA 技術(shù)是目前主流的蛋白質(zhì)組學(xué)定量技術(shù)，它采用DIA（Data Independent Acquisition，數(shù)據(jù)非依賴采集）技術(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，將整個(gè)質(zhì)譜掃描質(zhì)量范圍分為若干小窗口，依次對(duì)每個(gè)窗口的所有離子進(jìn)行碎裂，使其能夠?qū)呙鑵^(qū)間內(nèi)的所有肽段離子進(jìn)行高速一級(jí) MS 掃描再進(jìn)行二級(jí) MS/MS 分析。因此，DIA 能夠?qū)?fù)雜樣品中幾乎所有可檢測(cè)的分子進(jìn)行定量測(cè)定。 DIA 綜合了 shotgun proteomics 高通量檢測(cè)的特點(diǎn)與精準(zhǔn)定量分析的優(yōu)勢(shì)，是真正意義上的全掃描質(zhì)譜檢測(cè)手段。
技術(shù)路線
DIA先提取樣品中總蛋白，取出一部分做蛋白濃度測(cè)定及 SDS-PAGE 檢測(cè)，另取部分進(jìn)行胰蛋白酶酶解，對(duì)酶解肽段除鹽之后，對(duì)樣品進(jìn)行 LC-MS/MS 鑒定。LC-MS/MS 鑒定分為兩個(gè)主要步驟，第一步采用傳統(tǒng)的 DDA 方法建立蛋白譜圖庫(kù)或者直接使用軟件搜庫(kù)，第二步采用 DIA 技術(shù)采集每個(gè)樣品的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，在 DDA 數(shù)據(jù)庫(kù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行譜圖匹配、定量信息的提取以及后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析等。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
與其它傳統(tǒng)定量技術(shù)相比，DIA 技術(shù)具有非常明顯的優(yōu)勢(shì)。
1）與 Label-free（非標(biāo)記定量）技術(shù)相比：
Label-free 技術(shù)采用的是 DDA 數(shù)據(jù)采集模式，因而其具有 DDA 固有的缺陷——低豐度蛋白鑒定重復(fù)性差，Cycle Time 變化大等；而且 Label-free 采用 MS1 質(zhì)譜信息進(jìn)行蛋白質(zhì)定量，易受基質(zhì)干擾，定量結(jié)果準(zhǔn)確性較差。
2）與 ITRAQ/TMT 技術(shù)相比：
ITRAQ/TMT技術(shù)采用的也是 DDA 數(shù)據(jù)采集模式，同樣具有 DDA 固有的缺陷；同時(shí) ITRAQ/TMT 技術(shù)在樣本基質(zhì)復(fù)雜時(shí)，易受到其他多肽的報(bào)告離子的干擾，導(dǎo)致定量結(jié)果存在比值壓縮的缺點(diǎn)， 定量結(jié)果準(zhǔn)確性不高。
與數(shù)據(jù)依賴掃描模式（DDA）相比，DIA方法具有更好的重復(fù)性、更高的蛋白覆蓋率和定量準(zhǔn)確度，特別適用于大樣本的研究?。
應(yīng)用領(lǐng)域
01
藥物研發(fā)?
DIA技術(shù)可用于藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究、藥物靶點(diǎn)鑒定和藥物劑量?jī)?yōu)化，提高藥物研發(fā)效率和準(zhǔn)確性?。
02
疾病研究?
在癌癥研究中，DIA技術(shù)可揭示腫瘤細(xì)胞的變化及其對(duì)治療的響應(yīng)，同時(shí)也可用于研究其他疾病的生物標(biāo)志物和蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)?。
03
生物醫(yī)學(xué)研究?
DIA技術(shù)有助于理解修飾在細(xì)胞功能和疾病發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制，為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出貢獻(xiàn)?。
結(jié)果展示
關(guān)于斯坦德科研事業(yè)部
斯坦德科研事業(yè)部始終堅(jiān)持以客戶為中心，為高校研究所、醫(yī)院、企業(yè)提供全方位的數(shù)據(jù)支撐。我們立足理論基礎(chǔ)研究，提供領(lǐng)先的組學(xué)技術(shù)服務(wù)及創(chuàng)新醫(yī)學(xué)樣本檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用，致力于成為科研行業(yè)的開(kāi)拓者與引領(lǐng)者。以豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)、先進(jìn)的儀器設(shè)備及卓越的專家團(tuán)隊(duì)助力代謝組學(xué)、蛋白組學(xué)、基因組學(xué)、多組學(xué)聯(lián)合、動(dòng)物建模、多糖結(jié)構(gòu)解析等行業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。
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